Kako izvajati serijske razredčitve

Vsebina

• faze
• 1. metoda Naredite preprosto razredčenje
• Metoda 2 Izračunajte končni faktor redčenja in koncentracijo

V kemiji je redčenje sestavljeno iz zmanjšanja koncentracije dane raztopine. Serijsko redčenje je preprosto ponavljajoče razredčenje izvirne raztopine za hitro povečanje faktorja redčenja. Ta vrsta redčenja se pogosto izvaja med poskusi, ki zahtevajo zelo razredčene raztopine in visoko natančnost, kot so tiste, ki vključujejo krivulje koncentracije na lestvici log ali tiste, ki omogočajo izračun gostote bakterij v določenih medijih. Zelo pogosto se izvajajo v biokemiji, mikrobiologiji, farmakologiji ali kemiji.

faze

1. metoda Naredite preprosto razredčenje

1. 
   

   
   Določite pravo tekočino za redčenje (ali razredčilo). Izbira razredčila je zelo pomembna in je odvisna od raztopine, ki jo želite razredčiti. Redčilo je pogosto destilirana voda, vendar ni sistematično. Tako se z raztopino, ki vsebuje bakterije ali celice, namesto tega uporablja gojišče. Za serijsko redčenje se v vseh epruvetah uporablja isto topilo.
   • Če niste prepričani, katero topilo uporabiti, poiščite pomoč pristojne osebe ali poiščite po internetu, kaj morajo storiti ljudje za podobno izkušnjo.

2. 
   

   
   Pripravite več epruvet, ki vsebujejo 9 ml tekočine za redčenje. Te epruvete se bodo uporabljale za zaporedna redčenja. Načelo je preprosto, vzeli boste vzorec izhodne raztopine in jo prenesli v naslednjo cev, nato vzeli vzorec te epruvete, da jo boste dali v naslednjo itd.
   • Pred začetkom redčenja je priporočljivo vnaprej določiti epruvete, da se pozneje ne zmedete.
   • V vsaki epruveti boste imeli koncentracijo za deset manj kot v prejšnji. Prva cev bo vsebovala razredčeno raztopino v deseti, drugi, stoti, tretji, tisočni in tako naprej. Vnaprej določite število razredčil, da se izognete temu, da bi nastali več epruvet, kot je potrebno, in po nepotrebnem odpadno razredčilo.

3. 
   

   
   
   
   Pripravite epruveto z materino raztopino. Dajte vsaj 2 ml. Najmanjša količina osnovne raztopine za serijsko redčenje je en mililiter. Za možno drugo razredčenje pustite 2 ml. To cev matične raztopine, lahko označite s "SM".
   • Pred začetkom serijskega redčenja dobro vmešajte začetno raztopino.

4. 
   

   
   Naredite prvo razredčenje. Pipetirajte 1 ml osnovne raztopine v epruveto z oznako "SM" in to količino prenesite v označeno epruveto. 1/10 ki že vsebuje 9 ml tekočine za redčenje. Mešamo, da dobimo homogeno raztopino. V tej epruveti je zdaj 10 ml raztopine: 1 ml osnovne raztopine in 9 ml tekočine za redčenje. Ta nova rešitev je desetkrat manj koncentrirana kot prejšnja.

5. 
   

   
   Izvedite drugo razredčenje. V drugem serijskem razredčenju narišete 1 ml označene raztopine cevi 1/10 in jo boš nalil v cev 1/100 ki že vsebuje 9 ml tekočine za redčenje. Cev 1/10 pred vzorčenjem dobro premešamo. Ko je prenos končan, dobro premešajte cev 1/100. Raztopina iz označene cevi 1/10 je 10-krat bolj koncentrirana kot v cevi z oznako 1/100.

6. 
   

   
   
   
   Po potrebi ponovite to manipulacijo. Ta postopek lahko ponovite tolikokrat, dokler ne dosežete želenega redčenja. Za poskus, ki vključuje koncentracijske krivulje, lahko tako dobite vrsto raztopin z razredčitvijo na enoto, deseto (1/10), stoto (1/100) ali tisočno (1/1000).

Metoda 2 Izračunajte končni faktor redčenja in koncentracijo

1. 
   

   
   Izračunaj razmerje končno redčenje po serijskem redčenju. Skupno razmerje redčenja dobimo tako, da množimo faktor redčenja sam, tolikokrat, kolikor gre za redčenja. Matematično je formula naslednja: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_ns D_t ki predstavljajo skupni faktor redčenja in D_n, razmerje redčenja.
   • Predpostavimo, da 4-krat zapored redčite 1/10 tekočine. V formuli zamenjajte faktor redčenja z njegovo vrednostjo: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
   • Končni faktor redčenja četrte epruvete v vaši serijski razredčitvi je 1/10 000. Koncentracija raztopine zadnje epruvete je zdaj 10 000-krat nižja od koncentracije prvotne raztopine.

2. 
   

   
   Po razredčenju določite koncentracijo raztopine. Če želite najti končno koncentracijo raztopine po serijskem redčenju, morate vedeti začetno koncentracijo. Formula je torej: C_končni = C_začetna/ As C_končni predstavlja končno koncentracijo razredčene raztopine, C_začetna, koncentracija osnovne raztopine in D, vnaprej določeno razmerje razredčenja.
   • Če torej razredčite celično raztopino s koncentracijo 1.000.000 celic na ml in je vaše razmerje razredčenja nastavljeno na 1.000, kakšna bo končna koncentracija razredčenega vzorca?
   • Uporabite formulo:
     • C_končni = C_začetna/ A
     • C_končni = 1 000 000/1 000
     • C_končni = 1000 celic / ml

3. 
   

   
   Bodite pozorni na uporabljene enote. Pri izračunih vedno preverite, ali uporabljate iste enote. Če torej začnete s koncentracijo celic na ml, bo vaš končni rezultat tudi v celicah na ml. Če je vaša začetna koncentracija v delih na milijon (ppm), bo vaša končna koncentracija v delih na milijon.